1. Při stanovení endotoxinu v krvi věnujte pozornost výběru metod a činidel.

2. Příprava plazmy nebo séra

Jako běžný klinický vzorek je hlavním vzorkem plazma a její míra využití je více než 95 %. Proto je velmi důležité připravit plazmu jako hlavní součást tělesné tekutiny. Endotoxin je podle Dase obecně vázán na krevní destičky kromě svého volného stavu, proto je vhodnější jako vzorek použít plazmu obsahující velké množství krevních destiček. Při přípravě lidské plazmy nebo zvířecí plazmy se v současné době v zahraničí, aby se zabránilo poškození buněk, používá převážně nízkoteplotní separace s použitím vzorků plazmy obsahující velké množství krevních destiček, to znamená při separačních podmínkách 4 ℃ 1000 gx10 minut nebo 3000 gx40 sekundové separační podmínky, když není k dispozici nízkoteplotní odstředivka. Za normálních teplot není dovoleno provádět vysokorychlostní a dlouhodobé separace. Kromě toho je třeba při separaci plazmy nebo séra zabránit bakteriální kontaminaci.

Příprava séra: pomocí injekční stříkačky bez antikoagulantu odeberte krev a přeneste ji do centrifugační zkumavky a umístěte ji do ledové vodní lázně na 30 minut při 4 ℃, 1000xg, 10 minut pro centrifugaci.

Po oddělení plazmy nebo séra, pokud se dočasně nepoužívá, může být zmrazeno na - 80 ℃ a použito do 1 měsíce. Poznámka Abyste zabránili adsorpci endotoxinu, použijte pro skladování skleněnou zkumavku.

3. Druhy a účinky antikoagulancií

Při přípravě plazmy má typ a množství antikoagulancií velký vliv na výtěžnost díky přidání některých antikoagulancií. Obecně mezi běžně používaná antikoagulancia patří hlavně heparin, citrát sodný a EDTA, z nichž nejrozšířenější je heparin. Víme však, že velké množství heparinu bude interferovat s endotoxinovou reakcí, zejména u metody dilučního zahřívání a metody extrakce chloroformem, což sníží rychlost výtěžnosti, ale má menší dopad na metodu PCA, takže množství přidaného heparinu a uvolňuje se při přípravě plazmy stačí 2~5 μ L/ml.