Stolní nízkorychlostní mrazicí odstředivka se používá v laboratoři pro primární separaci a extrakci biologických makromolekul, sedimentů apod. Její otočná hlava je vyrobena převážně z hliníkové slitiny, která je plochého typu a úhlového typu. Odstředivá trubice je vyrobena z tvrdého skla, polyetylenového tvrdého plastu a trubice z nerezové oceli. Odstředivka je vybavena hnacím motorem, časovačem, regulátorem (ukazatelem rychlosti) a chladicím systémem (nastavitelný rozsah teplot - 20~ 40 ℃), který může nahradit rotační hlavy s různými kapacitami a různými typy rychlostí otáčení podle na potřeby odstředivého materiálu.

Podrobné kroky centrifugace pro extrakci cytoplazmatických a jaderných proteinů stolní nízkorychlostní mrazicí centrifugou:

1. Určete stav buněčného růstu. Stav buněčného růstu by měl být 80 % nebo lepší:

2. Centrifugujte při 1500 ot./min. po dobu 5 minut

3. Odstraňte supernatant, promyjte buňky stejným objemem studeného PBS a opakujte 3krát jako v kroku 2

4. Podle odhadovaného množství sraženiny přidejte do částic buněk 5násobek objemu izotonického sisbufferu, aby se buňky jemně suspendovaly a pokud možno se vyhnuly tvorbě pěny.

5. Přidejte lyzační pufr do suspendovaných buněk a položte jej na led na 15 minut, aby se buňky roztáhly, což lze zkontrolovat mikroskopem

6. Pro expandované buňky v buněčném experimentu přidejte 10 % IGEPALCA-630, aby konečná koncentrace dosáhla 0,3 %, dobře promíchejte a jemně přidejte

7. Okamžitě odstřeďte (použijte 1,5ml EP zkumavku při 5500 ot./min po dobu 30 s pro velká množství; použijte 50ml zkumavku při 5500 ot./min po dobu 2 minut pro velká množství)

8. Přeneste supernatant (cytoplazmatický protein) do nové mrazicí zkumavky

9. Suspendujte buňky v 5násobném objemu suspendovaných částic v izotonickém pufru a dobře promíchejte

10. Centrifugujte buněčnou suspenzi při 1500 ot./min po dobu 5 minut a odstraňte supernatant

11. Částice se suspendují ve 2/3násobku objemu extrakčního pufru

12. Umístěte zkumavku na vibrační mixér, protřepejte a míchejte při 700 ot./min po dobu 15 minut a poté při 1400 ot./min. po dobu 15 minut. Celý proces by měl být opatrný, aby nedošlo k pěně

13. Centrifugujte při 9400 ot./min. po dobu 15 minut, přeneste supernatant do nové zmrazené centrifugační zkumavky po centrifugaci při nízké teplotě

14.Rozdělte na několik částí a zmrazte je kapalným dusíkem a uložte je (dlouhodobé skladování by mělo být při -80 ℃, krátkodobé skladování by mělo být při -20 ℃)