Obecně lze říci, že díky složitému složení krve má mnoho látek, zejména plazma nebo sérum vyšších živočichů, silný interferenční účinek na reakci mezi činidlem TAL (LAL) a endotoxinem. Když tedy testujeme endotoxin takových vzorků, musíme před testováním odstranit rušivé látky.
V současnosti mezi interferující látky v plazmě patří především různé inhibitory proteáz, proteiny vázající endotoxiny a inhibitory plazminogenu. Pro kolorimetrii může faktor Xa rozkládat Boc-LEU-Gly-Arg-PNA peptidový řetězec. Proto je nutné tyto rušivé látky před stanovením eliminovat.
Metody předběžného ošetření pro odstranění rušivých látek z krve jsou následující:
(1) Metoda zřeďovacího ohřevu: plazma se zředí 3~10krát rozpuštěnou vodou a poté se zahřívá ve vodě o teplotě 37~100 ℃. Doba zdržení je obecně 5~10 minut;
(2) Metoda extrakce chloroformem: přidejte stejné množství chloroformu do plazmy a vibrujte po dobu 3 hodin, poté odeberte horní vrstvu pro detekci;
(3) Metoda ošetření etherem: přidání etheru do plazmy pro ošetření a odstranění etheru při 40 °C;
(4) Metoda kyseliny trifluoroctové: přidání kyseliny octové do plazmy pro úpravu pH 4,0 a poté použití K2HPO4 pro úpravu pH na 7~7,5;
(5) Metoda ošetření povrchově aktivní látkou: stejně jako metoda zřeďovacího ohřevu se pouze ředicí voda změní na povrchově aktivní látku;
(6) Gelová filtrace;
(7) Alkalická metoda ošetření: plazma byla udržována při 0,2NNaOH 37 °C po dobu 10 minut a poté neutralizována HCl;
(8) Metoda kyseliny chloristé (PCA) nebo nová metoda kyseliny chloristé (New PCA);
(9) Metoda perliček: vložte speciální pryskyřici absorbující endotoxin do plazmy, vyjměte ji a přidejte činidlo LAL pro reakci.
Z těchto metod jsou běžně používanými metodami metoda extrakce chloroformem, metoda zřeďovacího ohřevu, metoda kyseliny chloristé (PCA) a metoda nové metody kyseliny chloristé (New PCA). První dvě metody je třeba během stanovení prodiskutovat kvůli existenci míry obnovy endotoxinu, falešným pozitivům a dalším problémům. Metoda PCA (New PCA method) se díky dobré rychlosti výtěžnosti přidaného endotoxinu v současnosti používá hlavně v preklinické léčbě v Japonsku.